产品货号:
GL2658
中文名称:
六胺银染色液(改良Grocott-苏木素法)
英文名称:
产品规格:
6×50mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本六胺银染色液法采用苏木素复染(也可根据需要自行添加伊红对染),对卡氏肺囊虫、曲霉和白色念珠菌的显示效果很好,可看到囊虫或真菌与周围组织的关系。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法,经过Grocott改良之后组织经铬酸氧化,使真菌内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银,氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰,海波可以固定并洗去未还原的银离子。
组分 | 规格 | 保存 |
氯化金溶液 | 50mL | 4℃,避光 |
银溶液 | 1.5mL | |
六胺溶液 | 25mL | |
硼砂溶液 | 25mL | RT |
漂白剂 | 50mL | |
海波溶液 | 50mL | |
苏木素复染液 | 50mL | |
氧化剂 | 50mL | RT,避光 |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
- 蒸馏水、系列乙醇、环保浸蜡脱蜡透明液或二甲苯、中性树胶
- 水浴锅或恒温箱
- 实验中所用玻璃器皿应预先用硫酸洗液浸泡并用蒸馏水冲洗干净、烤干。
- 六胺银储备液可4℃保存,3个月有效。
- 配制好的六胺银工作液是一次性的,不宜久置。
- 六胺银工作液配制后应先放入温箱中预热,温度要达到60℃时,再放人切片进行染色。
- 如用水浴锅代替恒温箱,需将温度设定在48~50℃,否则切片会很快变黑而难以掌握,建议在恒温箱中孵育染色。
- 在低倍镜检时菌体不宜着色太黑,否则在高倍镜下观察则不够清晰透亮,特别需注意菌体成堆的地方的显色。
- 氯化金调色时一定要在显微镜下观察。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
- 组织固定于甲醛固定液中,常规脱水包埋,切片4~5μm,二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水洗。
- 切片入氧化剂氧化20min,流水稍洗。
- 入漂白剂处理1min,以除去氧化剂。
- 流水冲洗5min,蒸馏水浸洗2次,每次30~60s。
- 配制六胺银贮备液:取银溶液、六胺溶液,按6∶100比例混合即成,会有少量沉淀产生,充分溶解即可。
- 该试剂可4℃保存,3个月有效。
- 配制六胺银工作液:取六胺银贮备液、硼砂溶液,按106∶100比例混合,六胺银工作液是一次性的,不能久放。
- 配制后可放入60℃温箱中预热30min,再放人切片进行染色。
- 切片放入配制好的预热至60℃六胺银工作液中,加盖60℃恒温染色20~60min,切片呈淡黄色即可取出,经水洗后显微镜观察是否有菌体出现。
- 如有淡棕色菌体出现,应每隔5~10min观察1次以控制菌体着色深浅,直至显色理想。
- 蒸馏水洗,用氯化金溶液调色1~2min,蒸馏水洗20~40s。
- 置于海波溶液2min,流水冲洗5min。
- 滴加苏木素复染液染色5~10min,流水冲洗5~10min。
- 常规脱水,二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
真菌、上皮粘液、卡氏肺囊虫包囊壁 | 黑色或棕黑色 |
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